#SERVICES DE BIOLOGIE BIOLOGIE PROTÉINES ET MOLÉCULES

“SCIENCE DES PROTÉINES

Expression de protéines recombinantes dans différents systèmes d’expression

1. Génie génétique

1.2 Construction d’un ou plusieurs gènes par PCR
Génération de constructions homogènes ou hétérogènes par PCR d’extension de chevauchement.

1.3 Génération de mutants de protéines par mutagenèse dirigée par site PCR

1.4 Insertion des constructions dans les plasmides d’expression

2. Expression bactérienne

2.1 Transformation dans un hôte bactérien approprié et préparation de stocks de glycérol

2.2 Optimisation de l’expression des protéines par un réglage fin du taux de croissance bactérienne et de la température

2.3 Caractérisation de l’expression des protéines sous forme soluble ou de corps d’inclusion

3. Purification des protéines

3.1 Purification native des protéines solubles

3.2 Purification du repliement à partir des corps d’inclusion

“MOLLECULAIRE

6. Techniques de clonage

7. Différents types de PCR

7.1 Essais de gènes rapporteurs

7.2 Isolation de l’ADN génomique et plasmidique

7.3 Détection de l’ADN résiduel de mammifères par analyse d’hybridation

7.3 Isolation de l’ARN total

8. Faisabilité, développement et validation des essais

9. Analyse d’échantillons biologiques

“MÉTHODOLOGIE

✔️ Dichroïsme circulaire

✔️ Technique de fluorescence

✔️ Microscope électronique

✔️ Localisation subcellulaire basée sur le fractionnement cellulaire

✔️ Dosage des protéines totales

✔️ Essais de propagation in vitro